食品微生物检测技术中的常用药品试剂和培养基配制

附录A 培养基和试剂

（节选自GB 4789.2—2016《食品微生物学检验 菌落总数测定》）

A.1　平板计数琼脂（plate count agar，PCA）培养基

A.1.1　成分

胰蛋白胨　5.0g

酵母浸膏　2.5g

葡萄糖　1.0g

琼脂　15.0g

蒸馏水　1000mL

pH　7.0±0.2

A.1.2　制法

将上述成分加于蒸馏水中，煮沸溶解，调节pH。分装试管或锥形瓶，121℃高压灭菌15min。

A.2　磷酸盐缓冲液

A.2.1　成分

磷酸二氢钾（KH₂PO₄）　34.0g

蒸馏水　500mL

pH　7.2

A.2.2　制法

贮存液：称取34.0g的磷酸二氢钾溶于500mL蒸馏水中，用大约175mL的1mol/L氢氧化钠溶液调节pH，用蒸馏水稀释至1000mL后贮存于冰箱。

稀释液：取贮存液1.25mL，用蒸馏水稀释至1000mL，分装于适宜容器中，121℃高压灭菌15min。

A.3　无菌生理盐水

A.3.1　成分

氯化钠　8.5g

蒸馏水　1000mL

A.3.2　制法

称取8.5g氯化钠溶于1000mL蒸馏水中，121℃高压灭菌15min。

附录B 培养基和试剂

（节选自GB 4789.15—2016《食品微生物学检验 霉菌和酵母计数》）

B.1　马铃薯－葡萄糖－琼脂

B.1.1　成分

马铃薯（去皮切块）　300g

葡萄糖　20.0g

琼脂　20.0g

氯霉素　0.1g

蒸馏水　1000mL

B.1.2　制法

将马铃薯去皮切块，加1000mL蒸馏水，煮沸10～20min。用纱布过滤，补加蒸馏水至1000mL。

加入葡萄糖和琼脂，加热溶化，分装后，121℃灭菌20min。倾注平板前，用少量乙醇溶解氯霉素加入培养基中。

B.2　孟加拉红培养基

B.2.1　成分

蛋白胨　5.0g

葡萄糖　10.0g

磷酸二氢钾　1.0g

硫酸镁（无水）　0.5g

琼脂　20.0g

孟加拉红　0.033g

氯霉素　0.1g

蒸馏水　1000mL

B.2.2　制法

上述各成分加入蒸馏水中，加热溶化，补足蒸馏水至1000mL，分装后，121℃灭菌20min。倾注平板前，用少量乙醇溶解氯霉素加入培养基中。

附录C 培养基和试剂

（节选自GB 4789.3—2016《食品微生物学检验 大肠菌群计数》）

C.1　月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤

C.1.1　成分

胰蛋白胨或胰酪胨　20.0g

氯化钠　5.0g

乳糖　5.0g

磷酸氢二钾（K₂HPO₄）　2.75g

磷酸二氢钾（KH₂PO₄）　2.75g

月桂基硫酸钠　0.1g

蒸馏水　1000mL

pH　6.8±0.2

C.1.2　制法

将上述成分溶解于蒸馏水中，调节pH。分装到有玻璃小倒管的试管中，每管10mL。121℃高压灭菌15min。

C.2　煌绿乳糖胆盐（BGLB）肉汤

C.2.1　成分

蛋白胨　10.0g

乳糖　10.0g

牛胆粉（ox gall或ox bile）溶液　200mL

0.1%煌绿水溶液　13.3mL

蒸馏水　800mL

pH　7.2±0.1

C.2.2　制法

将蛋白胨、乳糖溶于约500mL　蒸馏水中，加入牛胆粉溶液200mL（将20.0g脱水牛胆粉溶于200mL蒸馏水中，调节pH至7.0～7.5），用蒸馏水稀释到975mL，调节pH，再加入0.1%煌绿水溶液13.3mL，用蒸馏水补足到1000mL，用棉花过滤后，分装到有玻璃小倒管的试管中，每管10mL。121℃高压灭菌15min。

C.3　结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）

C.3.1　成分

蛋白胨　7.0g

酵母膏　3.0g

乳糖　10.0g

氯化钠　5.0g

胆盐或3　号胆盐1.5g

中性红　0.03g

结晶紫　0.002g

琼脂　15～18g

蒸馏水　1000mL

pH　7.4±0.1

C.3.2　制法

将上述成分溶于蒸馏水中，静置几分钟，充分搅拌，调节pH。煮沸2min，将培养基冷却至45～50℃倾注平板。使用前临时制备，不得超过3h。

C.4　磷酸盐缓冲液

C.4.1　成分

磷酸二氢钾（KH₂PO₄）　34.0g

蒸馏水　500mL

pH　7.2

C.4.2　制法

贮存液：称取34.0g的磷酸二氢钾溶于500mL蒸馏水中，用大约175mL的1mol/L氢氧化钠溶液调节pH，用蒸馏水稀释至1000mL后贮存于冰箱。

稀释液：取贮存液1.25mL，用蒸馏水稀释至1000mL，分装于适宜容器中，121℃高压灭菌15min。

C.5　无菌生理盐水

C.5.1　成分

氯化钠　8.5g

蒸馏水　1000mL

C.5.2　制法

称取8.5g氯化钠溶于1000mL蒸馏水中，121℃高压灭菌15min。

C.6　1mol/L NaOH

C.6.1　成分

NaOH　40.0g

蒸馏水　1000mL

C.6.2　制法

称取40g氢氧化钠溶于1000mL蒸馏水中，121℃高压灭菌15min。

C.7　1mol/L HCl

C.7.1　成分

HCl　90mL

蒸馏水　1000mL

C.7.2　制法

移取浓盐酸90mL，用蒸馏水稀释至1000mL，121℃高压灭菌15min。

附录D 大肠菌群最可能数（MPN）检索表

（节选自GB 4789.3—2016《食品微生物学检验 大肠菌群计数》）

注：①本表采用3个稀释度［0.1g（mL）、0.01g（mL）和0.001g（mL）］，每个稀释度接种3管。

②表内所列检样量如改用1g（mL）、0.1g（mL）和0.01g（mL）时，表内数字应相应降低10倍；如改用0.01g（mL）、0.001g（mL）、0.0001g（mL）时，则表内数字应相应增高10倍，其余类推。

附录E 培养基和试剂

（节选自GB 4789.10—2016《食品微生物学检验 金黄色葡萄球菌检验》）

E.1　10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤

E.1.1　成分

胰酪胨（或胰蛋白胨）　17.0g

植物蛋白胨（或大豆蛋白胨）　3.0g

氯化钠　100.0g

磷酸氢二钾　2.5g

丙酮酸钠　10.0g

葡萄糖　2.5g

蒸馏水　1000mL

pH　7.3±0.2

E.1.2　制法

将上述成分混合，加热，轻轻搅拌并溶解，调节pH，分装，每瓶225mL，121℃高压灭菌15min。

E.2　7.5%氯化钠肉汤

E.2.1　成分

蛋白胨　10.0g

牛肉膏　5.0g

氯化钠　75g

蒸馏水　1000mL

pH　7.4

E.2.2　制法

将上述成分加热溶解，调节pH，分装，每瓶225mL，121℃高压灭菌15min。

E.3　血琼脂平板

E.3.1　成分

豆粉琼脂（pH7.4～7.6）　100mL

脱纤维羊血（或兔血）　5～10mL

E.3.2　制法

加热溶化琼脂，冷却至50℃，以无菌操作加入脱纤维羊血，摇匀，倾注平板。

E.4　Baird－Parker琼脂平板

E.4.1　成分

胰蛋白胨　10.0g

牛肉膏　5.0g

酵母膏　1.0g

丙酮酸钠　10.0g

甘氨酸　12.0g

氯化锂（LiCl·6H₂O）　5.0g

琼脂　20.0g

蒸馏水　950mL

pH　7.0±0.2

E.4.2　增菌剂的配法

30%卵黄盐水50mL与经过除菌过滤的1%亚碲酸钾溶液10mL混合，保存于冰箱内。

E.4.3　制法

将各成分加到蒸馏水中，加热煮沸至完全溶解，调节pH。分装每瓶95mL，121℃高压灭菌15min。

临用时加热熔化琼脂，冷至50℃，每95mL加入预热至50℃的卵黄亚碲酸钾增菌剂5mL摇匀后倾注平板。培养基应是致密不透明的。使用前在冰箱储存不得超过48h。

E.5　脑心浸出液肉汤（BHI）

E.5.1　成分

胰蛋白质胨　10.0g

氯化钠　5.0g

磷酸氢二钠（12H₂O）　2.5g

葡萄糖　2.0g

牛心浸出液　500mL

E.5.2　制法

加热溶解，调节pH，分装16mm×160mm试管，每管5mL置121℃，15min灭菌。

E.6　兔血浆

取柠檬酸钠3.8g，加蒸馏水100mL，溶解后过滤，装瓶，121℃高压灭菌15min。

兔血浆制备：取3.8%柠檬酸钠溶液1份，加兔全血4份，混好静置（或以3000r/min离心30min），使血液细胞下降，即可得血浆。

E.7　磷酸盐缓冲液

E.7.1　成分

磷酸二氢钾（KH₂PO₄）　34.0g

蒸馏水　500mL

pH　7.2

E.7.2　制法

贮存液：称取34.0g的磷酸二氢钾溶于500mL蒸馏水中，用大约175mL的1mol/L氢氧化钠溶液调节pH至7.2，用蒸馏水稀释至1000mL后贮存于冰箱。

稀释液：取贮存液1.25mL，用蒸馏水稀释至1000mL，分装于适宜容器中，121℃高压灭菌15min。

E.8　营养琼脂小斜面

E.8.1　成分

蛋白胨　10.0g

牛肉膏　3.0g

氯化钠　5.0g

琼脂　15.0～20.0g

蒸馏水　1000mL

pH　7.2～7.4

E.8.2　制法

将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内，加入15%氢氧化钠溶液约2mL调节pH至7.2～7.4。加入琼脂，加热煮沸，使琼脂溶化，分装13mm×130mm管，121℃高压灭菌15min。

E.9　革兰染色液

E.9.1　结晶紫染色液

E.9.1.1　成分

结晶紫　1.0g

95%乙醇　20.0mL

1%草酸铵水溶液　80.0mL

E.9.1.2　制法

将结晶紫完全溶解于乙醇中，然后与草酸铵溶液混合。

E.9.2　革兰碘液

E.9.2.1　成分

碘　1.0g

碘化钾　2.0g

蒸馏水　300mL

E.9.2.2　制法(www.zuozong.com)

将碘与碘化钾先行混合，加入蒸馏水少许充分振摇，待完全溶解后，再加蒸馏水至300mL。

E.9.3　沙黄复染液

E.9.3.1　成分

沙黄　0.25g

95%乙醇　10.0mL

蒸馏水　90.0mL

E.9.3.2　制法

将沙黄溶解于乙醇中，然后用蒸馏水稀释。

E.9.4　染色法

a.涂片在火焰上固定，滴加结晶紫染液，染1min，水洗。

b.滴加革兰碘液，作用1min，水洗。

c.滴加95%乙醇脱色15～30s，直至染色液被洗掉，不要过分脱色，水洗。

d.滴加复染液，复染1min，水洗、待干、镜检。

E.10　无菌生理盐水

E.10.1　成分

氯化钠　8.5g

蒸馏水　1000mL

E.10.2　制法

称取8.5g氯化钠溶于1000mL蒸馏水中，121℃高压灭菌15min。

附录F 葡萄球菌肠毒素检验

（节选自GB 4789.10—2016《食品微生物学检验 金黄色葡萄球菌检验》）

F.1　试剂和材料

除另有规定外，所用试剂均为分析纯，试验用水应符合GB/T 6682—2008《分析实验室用水规格和试验方法》对一级水的规定。

F.1.1　A、B、C、D、E型金黄色葡萄球菌肠毒素分型ELISA检测试剂盒。

F.1.2　pH试纸，范围3.5～8.0，精度0.1。

F.1.3　0.25mol/L、pH8.0的Tris缓冲液：将121.1g的Tris溶解到800mL的去离子水中，待温度冷至室温后，加42mL浓HCl，调pH至8.0。

F.1.4　pH7.4的磷酸盐缓冲液：称取NaH₂PO₄·H₂O 0.55g（或NaH₂PO₄· 2H₂O 0.62g）、Na₂HPO₄·2H₂O 2.85g（或Na₂HPO₄·12H₂O 5.73g）、NaCl 8.7g溶于1000mL蒸馏水中，充分混匀即可。

F.1.5　庚烷

F.1.6　10%次氯酸钠溶液

F.1.7　肠毒素产毒培养基

F.1.7.1　成分

蛋白胨　20.0g

胰消化酪蛋白　200mg（氨基酸）

氯化钠　5.0g

磷酸氢二钾　1.0g

氯化钙　0.1g

硫酸镁　0.2g

烟酸　0.01g

蒸馏水　1000mL

pH　7.2～7

F.1.7.2　制法

将所有成分混于水中，溶解后调节pH，121℃高压灭菌30min。

F.1.8　营养琼脂

F.1.8.1　成分

蛋白胨　10.0g

牛肉膏　3.0g

氯化钠　5.0g

琼脂　15.0～20.0g

蒸馏水　1000mL

F.1.8.2　制法

将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内，加入15%氢氧化钠溶液约2mL，校正pH至7.2～7.4。加入琼脂，加热煮沸，使琼脂溶化。分装烧瓶，121℃高压灭菌15min。

F.2　仪器和设备

F.2.1　电子天平：感量0.01g。

F.2.2　均质器。

F.2.3　离心机：转速3000～5000g。

F.2.4　离心管：50mL。

F.2.5　滤器：滤膜孔径0.2μm。

F.2.6　微量加样器：20～200μL、200～1000μL。

F.2.7　微量多通道加样器：50～300μL。

F.2.8　自动洗板机（可选择使用）。

F.2.9　酶标仪：波长450nm。

F.3　原理

本方法可用A、B、C、D、E型金黄色葡萄球菌肠毒素分型酶联免疫吸附试剂盒完成。本方法测定的基础是酶联免疫吸附反应（ELISA）。96孔酶标板的每一个微孔条的A～E孔分别包被了A、B、C、D、E型葡萄球菌肠毒素抗体，H孔为阳性质控，已包被混合型葡萄球菌肠毒素抗体，F和G孔为阴性质控，包被了非免疫动物的抗体。样品中如果有葡萄球菌肠毒素，游离的葡萄球菌肠毒素则与各微孔中包被的特定抗体结合，形成抗原抗体复合物，其余未结合的成分在洗板过程中被洗掉；抗原抗体复合物再与过氧化物酶标记物（二抗）结合，未结合上的酶标记物在洗板过程中被洗掉；加入酶底物和显色剂并孵育，酶标记物上的酶催化底物分解，使无色的显色剂变为蓝色；加入反应终止液可使颜色由蓝变黄，并终止了酶反应；以450nm波长的酶标仪测量微孔溶液的吸光度值，样品中的葡萄球菌肠毒素与吸光度值成正比。

F.4　检测步骤

F.4.1　从分离菌株培养物中检测葡萄球菌肠毒素方法

待测菌株接种营养琼脂斜面（试管18mm×180mm）37℃培养24h，用5mL生理盐水洗下菌落，倾入60mL产毒培养基中，每个菌种一瓶，37℃振荡培养48h，振速为100次/min，吸出菌液离心，8000r/min 20min，加热100℃，10min，取上清液，取100μL稀释后的样液进行试验。

F.4.2　从食品中提取和检测葡萄球菌毒素方法

F.4.2.1　乳和乳粉

将25g乳粉溶解到125mL、0.25mol/L、pH8.0的Tris缓冲液中，混匀后同液体乳一样按以下步骤制备。将乳于15℃，3500g离心10min。将表面形成的一层脂肪层移走，变成脱脂乳。用蒸馏水对其进行稀释（1∶20）。取100μL稀释后的样液进行试验。

F.4.2.2　脂肪含量不超过40%的食品

称取10g样品绞碎，加入pH7.4的PBS液15mL进行均质。振摇15min。于15℃，3500g离心10min。必要时，移去上面脂肪层。取上清液进行过滤除菌。取100μL的滤出液进行试验。

F.4.2.3　脂肪含量超过40%的食品

称取10g样品绞碎，加入pH7.4的PBS液15mL进行均质。振摇15min。于15℃，3500g离心10min。吸取5mL上层悬浮液，转移到另外一个离心管中，再加入5mL的庚烷，充分混匀5min。于15℃，3500g离心5min。将上部有机相（庚烷层）全部弃去，注意该过程中不要残留庚烷。将下部水相层进行过滤除菌。取100μL的滤出液进行试验。

F.4.2.4　其他食品可酌情参考上述食品处理方法。

F.4.3　检测

F.4.3.1　所有操作均应在室温（20～25℃）下进行，A、B、C、D、E型金黄色葡萄球菌肠毒素分型ELISA检测试剂盒中所有试剂的温度均应回升至室温方可使用。测定中吸取不同的试剂和样品溶液时应更换吸头，用过的吸头以及废液要浸泡到10%次氯酸钠溶液中。

F.4.3.2　将所需数量的微孔条插入框架中（一个样品需要一个微孔条）。将样品液加入微孔条的A～G孔，每孔100μL。H孔加100μL的阳性对照，用手轻拍微孔板充分混匀，用粘胶纸封住微孔以防溶液挥发，置室温下孵育1h。

F.4.3.3　将孔中液体倾倒至含10%次氯酸钠溶液的容器中，并在吸水纸上拍打几次以确保孔内不残留液体。每孔用多通道加样器注入250μL的洗液，再倾倒掉并在吸水纸上拍干。重复以上洗板操作4次。

本步骤也可由自动洗板机完成。

F.4.3.4　每孔加入100μL的酶标抗体，用手轻拍微孔板充分混匀，置室温下孵育1h。

F.4.3.5　重复F.4.3.3的洗板程序。

F.4.3.6　加50μL的TMB底物和50μL的发色剂至每个微孔中，轻拍混匀，室温黑暗避光处孵育30min。

F.4.3.7　加入100μL的2mol/L硫酸终止液，轻拍混匀，30min内用酶标仪在450nm波长条件下测量每个微孔溶液的OD值。

F.4.4　结果计算

F.4.4.1　质量控制

测试结果阳性质控的OD值要大于0.5，阴性质控的OD值要小于0.3，如果不能同时满足以上要求，测试的结果不被认可。对阳性结果要排除内源性过氧化物酶的干扰。

F.4.4.2　临界值的计算

每一个微孔条的F孔和G孔为阴性质控，两个阴性质控OD值的平均值加上0.15为临界值。

示例：阴性质控1＝0.08

阴性质控2＝0.10

平均值＝0.09

临界值＝0.09+0.15＝0.24

F.4.4.3　结果表述

OD值小于临界值的样品孔判为阴性，表述为样品中未检出某型金黄色葡萄球菌肠毒素；OD值大于或等于临界值的样品孔判为阳性，表述为样品中检出某型金黄色葡萄球菌肠毒素。

F.5　生物安全

因样品中不排除有其他潜在的传染性物质存在，所以要严格按照GB 19489—2008《实验室生物安全通用要求》对废弃物进行处理。

附录G 金黄色葡萄球菌最可能数（MPN）检索表

（节选自GB 4789.10—2016《食品微生物学检验 金黄色葡萄球菌检验》）

每克（毫升）检样中金黄色葡萄球菌最可能数（MPN）的检索见表G.1。

表G.1 金黄色葡萄球菌最可能数（MPN）检索表

注：①本表采用3个稀释度［0.1g（mL）、0.01g（mL）和0.001g（mL）］，每个稀释度接种3管。

②表内所列检样量如改用1g（mL）、0.1g（mL）和0.01g（mL）时，表内数字应相应降低10倍；如改用0.01g（mL）、0.001g（mL）、0.0001g（mL）时，则表内数字应相应增高10倍，其余类推。

附录H培养基及试剂

（节选自GB 4789.35—2016《食品微生物学检验 乳酸菌检验》）

H.1　MRS培养基

H.1.1　成分

蛋白胨　10.0g

牛肉粉　5.0g

酵母粉　4.0g

葡萄糖　20.0g

吐温80　1.0mL

K₂HPO₄·7H₂O　2.0g

醋酸钠·3H₂O　5.0g

柠檬酸三铵　2.0g

MgSO₄·7H₂O　0.2g

MnSO₄·4H₂O　0.05g

琼脂粉　15.0g

pH　6.2

H.1.2　制法

将上述成分加入到1000mL蒸馏水中，加热溶解，调节pH，分装后121℃高压灭菌15～20min。

H.1.3　莫匹罗星锂盐（Li－Mupirocin）改良MRS培养基

H.1.3.1莫匹罗星锂盐（Li－Mupirocin）储备液制备：称取50mg莫匹罗星锂盐（Li－Mupirocin）加入到50mL蒸馏水中，用0.22μm微孔滤膜过滤除菌。

H.1.3.2　制法

将H.1.1　成分加入到950mL蒸馏水中，加热溶解，调节pH，分装后于121℃高压灭菌15～20min。临用时加热熔化琼脂，在水浴中冷至48℃，用带有0.22μm微孔滤膜的注射器将莫匹罗星锂盐（Li－Mupirocin）储备液加入到熔化琼脂中，使培养基中莫匹罗星锂盐（Li－Mupirocin）的浓度为50μg/mL。

H.2　MC培养基

H.2.1　成分

大豆蛋白胨　5.0g

牛肉粉　3.0g

酵母粉　3.0g

葡萄糖　20.0g

乳糖　20.0g

碳酸钙　10.0g

琼脂　15.0g

蒸馏水　1000mL

1%中性红溶液　5.0mL

pH　6.0

H.2.2　制法

将前面7　种成分加入蒸馏水中，加热溶解，调节pH，加入中性红溶液。分装后121℃高压灭菌15～20min。

H.3　乳酸杆菌糖发酵管

H.3.1　基础成分

牛肉膏　5.0g

蛋白胨　5.0g

酵母浸膏　5.0g

吐温80　0.5mL

琼脂　1.5g

1.6%溴甲酚紫酒精溶液　1.4mL

蒸馏水　1000mL

H.3.2　制法

按0.5%加入所需糖类，并分装小试管，121℃高压灭菌15～20min。

H.4　七叶苷发酵管

H.4.1　成分

蛋白胨　5.0g

磷酸氢二钾　1.0g

七叶苷　3.0g

柠檬酸铁　0.5g

1.6%溴甲酚紫酒精溶液　1.4mL

蒸馏水　100mL

H.4.2　制法

将上述成分加入蒸馏水中，加热溶解，121℃高压灭菌15～20min。

H.5　革兰染色液

H.5.1　结晶紫染色液

H.5.1.1　成分

结晶紫　1.0g

95%乙醇　20mL

1%草酸铵水溶液　80mL

H.5.1.2　制法

将结晶紫完全溶解于乙醇中，然后与草酸铵溶液混合。

H.5.2　革兰碘液

H.5.2.1　成分

碘　1.0g

碘化钾　2.0g

蒸馏水　300mL

H.5.2.2　制法

将碘与碘化钾先进行混合，加入蒸馏水少许，充分振摇，待完全溶解后，再加蒸馏水至300mL。

H.5.3　沙黄复染液

H.5.3.1　成分

沙黄　0.25g

95%乙醇　10mL

蒸馏水　90mL

H.5.3.2　制法

将沙黄溶解于乙醇中，然后用蒸馏水稀释。

H.5.4　染色法

H.5.4.1　将涂片在酒精灯火焰上固定，滴加结晶紫染色液，染1min，水洗。

H.5.4.2　滴加革兰碘液，作用1min，水洗。

H.5.4.3　滴加95%乙醇脱色，15～30s，直至染色液被洗掉，不要过分脱色，水洗。

H.5.4.4　滴加复染液，复染1min。水洗、待干、镜检。

附录I 培养基和试剂

（节选自GB 4789.27—2008《食品微生物学检验 鲜乳中抗生素残留检验》）

I.1　灭菌脱脂乳

I.1.1　成分

无抗生素的脱脂乳

I.1.2　制法

经115℃灭菌20min。也可采用无抗生素的脱脂牛乳粉，以蒸馏水10倍稀释，加热至完全溶解，115℃灭菌20min。

I.2　4%2，3，5－氯化三苯四氨唑（TTC）水溶液

I.2.1　成分

灭菌蒸馏水

I.2.2　制法

称取TTC　，溶于灭菌蒸馏水中，装褐色瓶内于2～5℃保存。如果溶液变为半透明的白色或淡褐色，则不能再用。临用时灭菌蒸馏水5倍稀释，成为4%水溶液。

I.3　青霉素G参照溶液

I.3.1　成分

青霉素G钾盐

无菌磷酸盐缓冲溶液

无抗生素的脱脂乳

I.3.2　制法

精密称取青霉素G钾盐标准品，溶于无菌磷酸盐缓冲溶液中，使其浓度为100～1000IU/mL。再将该溶液用灭菌的无抗生素的脱脂乳稀释至0.006IU/mL，分装于无菌小试管中，密封备用。－20℃保存不超过6个月。